德国弗劳恩霍夫应用研究促进协会北京代表处
CTCELECT:从人类血液中分离单个稀有细胞

​​弗劳恩霍夫IMM

弗劳恩霍夫微工程与微系统研究所

 

CTCELECT:从人类血液中分离单个稀有细胞
 

 

© Fraunhofer IMM

循环肿瘤细胞 (CTC)

 

联系方式

Sabine Alebrand博士

弗劳恩霍夫微工程和微系统研究所 IMM

sabine.alebrand@imm.fraunhofer.de

Carl-Zeiss-Strasse 18-20 55129 Mainz | 德国

www.imm.fraunhofer.de

 

要闻速览

 

从 7.5 ml 全血样本中全自动分离 CTC

结合两步流程 -

第 1 步:免疫磁性富集;

第 2 步:隔离/分配

用于隔离/分配步骤的微流体卡盒技术

直接在微量滴定板的孔中以 1-3 µl 液滴精确分配细胞

每个工艺步骤的出色回收率 ~ 90%(加标 MCF7 细胞模型系统)

用于进一步分析的分离细胞的高纯度(10 个 CTC 中只有 1 个没有白细胞)

灵活的平台技术; 适合特定应用的检测方法

用户(试剂的选择、工艺步骤的编程)

可以独立使用两个模块

 

关键词:细胞分离,单细胞分析,液体活检,CTC,微流体
 

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CTCelect 演示器,用于全自动分离 CTC 7.5 毫升血样

 

用于未来癌症治疗的液体活检

 

预计未来的癌症治疗将强烈依赖“液体活检”,这是基于对癌症患者液体样本(例如血液)的分析。其通过癌症患者 (CTC) 血液中循环的肿瘤细胞来获取有关肿瘤亚型的详细分子诊断信息,从而为每位患者量身定制治疗干预措施,即个性化医疗。然而,以高灵敏度和特异性从数十亿血细胞中可靠地检测并分离罕见的 CTC需要特殊手段。

 

CTCelect 仪器

 

CTCelect 是一种全自动仪器,可将临床血液采样与最先进的单细胞分析直接联系起来。 CTCelect 从标准采样管中的原始人类血液样本开始,富集 CTC,在连续流动中检测它们,并将单个 CTC 选择性地分配到标准微量滴定板的孔中,类似于单细胞分析的起点。用户可以通过直观的图形用户界面调整相应的分析。
 


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工作流程在仪器的两个主要功能模块中实现:

 

1) 浓缩模块

从装有 7.5 ml 血液的血管开始,全自动移液站使用特定的免疫磁珠以及荧光抗体(例如 PE 、FITC、量子点)富集 CTC,将样品体积减少到 0.5 ml——该过程依赖于定制的试剂盒。除了试剂盒试剂外还需要标准实验室耗材(一次性移液吸头和管)。富集和标记过程可使用多达 11 个试管,能够灵活地选择各种试剂、缓冲液、磁珠、抗体和荧光团。

 

2) 隔离模块

预富集的样品会被自动转移到微流控柱中。集成的流式细胞术模块检测 CTC 并触发分配单元。第二个荧光通道可用于平行检测第二种细胞类型,例如用适当的荧光标记物标记的白细胞、对照颗粒或第二种 CTC 群体。 CTC 被单独分配到微量滴定板的孔中,如果需要,也可以汇集分配的细胞。微流体盒是一次性的,专用于 CTCelect 仪器。所有处理步骤均在设备内部自动执行并被最简化,仅限于(重新)在工作台上放置试管、微量滴定板、微流体盒和缓冲液瓶。